電泳槽的使用方法及注意事項(xiàng)

        所謂電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)。由于電荷和分子量不同，不同的物質(zhì)在電場(chǎng)中以不同的速度移動(dòng)。根據(jù)這一特點(diǎn)，可以利用電泳對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。 ，或某種混合物用于成分分析或單成分提取制備，在臨床試驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)研究中具有極其重要的意義。電泳儀就是根據(jù)上述原理設(shè)計(jì)制造的。下面簡(jiǎn)單介紹一下它的用法和注意事項(xiàng)。
        如何使用
        1、先用電線將電泳槽的兩個(gè)電極與電泳儀的直流輸出端連接起來，注意不要接反。
         2、將電泳儀的電源開關(guān)轉(zhuǎn)到關(guān)閉位置，將電壓旋鈕轉(zhuǎn)到較小的位置，根據(jù)工作需要選擇電壓電流的電壓電流范圍。
         3. 打開電源，緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)電壓調(diào)節(jié)旋鈕，直到達(dá)到所需電壓，設(shè)置電泳終止時(shí)間，然后開始電泳。
         4、工作完成后，轉(zhuǎn)動(dòng)旋鈕開關(guān)至零位或關(guān)閉狀態(tài)，拔出電泳插頭。
        筆記
        1、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后，嚴(yán)禁人體接觸電極、電泳物體等可能帶電的部位，也不得在電泳槽內(nèi)取放東西。如有必要，請(qǐng)先關(guān)閉電源，以免觸電。同時(shí)儀表必須有良好的接地端子，防止漏電。
         2、儀器通電后，請(qǐng)勿臨時(shí)加拔輸出引線插頭，以防短路。雖然儀器裝有保險(xiǎn)絲，但短路仍可能對(duì)儀器造成損壞。
         3.由于不同介質(zhì)支撐的電阻值不同，電泳時(shí)通過的電流量也不同，游泳速度和到達(dá)終點(diǎn)所需的時(shí)間也不同。因此，不同介質(zhì)載體的電泳不應(yīng)在同一臺(tái)電泳儀上同時(shí)進(jìn)行。
         4、當(dāng)總電流不超過儀表額定電流（電流量程較大）時(shí)，可以多槽聯(lián)合使用，但一定要注意不要帶載，否則容易影響儀表壽命。
         5、在某些特殊情況下，當(dāng)需要檢查儀器的電泳輸入時(shí)，允許在穩(wěn)態(tài)下空載開機(jī)，但在穩(wěn)態(tài)下開機(jī)前必須先接負(fù)載，否則電壓表指針會(huì)跳的很大，容易造成不必要的人機(jī)損壞。
         6、在使用過程中如發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象，如巨響、放電、異味等，必須立即切斷電源進(jìn)行維修，以免發(fā)生事故。
        夾層式立式電泳槽使用方法：
        一、零部件
        (一)鉑絲儲(chǔ)罐一對(duì)，配備冷卻裝置和電泳緩沖液出口。
         (二)凹膠框，配玻璃板，可制作厚度分別為1mm和1.5mm的凝膠板。操作時(shí)，選擇合適厚度的玻璃板和梳子配套使用。
         (3) 樣品孔模具（梳子）用于電泳加載。
         (4) 固定儲(chǔ)液罐的螺釘和螺母有4對(duì)，28D和30型有5對(duì)。
         (5) 五個(gè)橡膠管。兩個(gè)長(zhǎng)的用來連接冷卻水的進(jìn)出水口；兩個(gè)中長(zhǎng)的用于連接電極緩沖器；介質(zhì)液體出口；較短的一根用于連接儲(chǔ)罐之間的冷卻水。
         (六)電線1對(duì)。 2. 使用方法
        (一)清洗零件
        上述零件在組裝前必須*清潔。尤其是玻璃板和凹槽膠框，必須用泡沫海綿蘸少許肥皂粉或清潔劑*清潔。清洗干凈的玻璃板應(yīng)放在玻璃板架上，用水晾干后方可使用。
         (二)組裝電泳槽
        A. 1、將四顆固定螺絲插入儲(chǔ)液架（半上罐）對(duì)應(yīng)的孔中，然后將儲(chǔ)液架放在工作臺(tái)上。
         2、左手握住凹槽膠?？颍沂帜粗负椭兄肝兆〔ＡО宓膬蛇吘?，插入膠模框（注意手指不能碰到玻璃板在膠面上）。
         3、將帶玻璃的橡膠?？蚍旁趦?chǔ)液罐框架的上側(cè)，其下緣必須與儲(chǔ)液罐框架的下緣對(duì)齊。
         4. 用雙手拿起另一個(gè)儲(chǔ)液罐架，將其與桌面背面的儲(chǔ)液罐架對(duì)齊，并在位于儲(chǔ)液架有機(jī)玻璃架的橡膠架上做凸線坦克。
         5. 安裝四個(gè)螺母并擰緊螺釘。注意擰緊螺絲時(shí)用力要均勻，用雙手以斜角逐漸擰緊螺絲。
         6. 將電泳槽垂直豎立，放在桌面上。玻璃板較短的儲(chǔ)罐稱為上罐（陰），玻璃板較長(zhǎng)的儲(chǔ)罐稱為下罐（陽(yáng)）。它在長(zhǎng)玻璃板上。膠框之間有間隙。這個(gè)間隙可以沿著長(zhǎng)玻璃板的下端用融化的 10% 瓊脂填充。為防止氣泡滯留，可將一端稍稍抬起，將氣泡趕走。瓊脂*凝固后即可倒入凝膠。
         B、也可以垂直豎起凹槽，將裝有玻璃的橡膠?？蛑苯臃湃氚疾壑?，對(duì)稱擰緊螺絲，用瓊脂封底。
         (3)澆注膠
        1、先澆分離膠，凝固后再澆濃縮膠。灌膠前先連接冷卻水，夾住連接上下液槽的兩根膠管。
         2、用細(xì)尖滴管吸膠，從一端沿長(zhǎng)短玻璃板的縫隙加入膠水。為了防止氣泡，把另一端稍微拿起（氣泡往高處），繼續(xù)加膠水。對(duì)于單層膠（分離膠），加膠量距離短玻璃板頂部0.3厘米左右。輕輕加入少許水，用雙手輕輕插入梳子。膠凝后，可以形成一個(gè)凹進(jìn)的樣品孔。
         3、為防止漏膠，應(yīng)立即在上下儲(chǔ)液罐中加入蒸餾水，但蒸餾水不能太短于玻璃板邊緣。
         4.凝膠凝固后，可以看到樣品槽梳子和凝膠板之間有一層亮區(qū)
        具有不同的發(fā)射率。
         (四)取樣
        1. 松開連接上下水箱的兩根橡膠管上的夾子，放掉水箱中的蒸餾水，待水流出后再夾上夾子。
         2、用雙手輕輕取出樣品梳，可以看到清晰的樣品孔，并吸去孔內(nèi)的水分（注意不要損壞孔的字面）。
         3、上下儲(chǔ)液罐加慢；中間液體，液體高度應(yīng)*超過上液罐的短玻璃板邊緣。
         4、用微量注射器吸取一定量的樣品加入長(zhǎng)短玻璃板之間的凹凝膠樣品孔中（注意加入樣品的動(dòng)作要輕，針頭不能損壞橡膠表面）。
         (五)電泳
        一根儲(chǔ)罐線接電泳儀負(fù)極，下儲(chǔ)罐線接電泳儀正極。檢查接線是否正確，即可按要求的電壓和電流進(jìn)行電泳。
         (六)拆膠板
        電泳結(jié)束后，松開螺母，取出膠框，撕下玻璃板，在兩塊玻璃板下角之間的縫隙中，用刀片背面輕輕一撬膠面將玻璃板分開，將帶有橡膠板的玻璃板放在桌面上，用雙手沿著凝膠底部輕輕握住薄膜，然后將其放入一個(gè)大的培養(yǎng)皿中進(jìn)行染色。漂洗脫色后可以清晰地看到橡膠板。條帶分離
        常見問題及解決方法： 1、紋路和拖尾：是樣品溶解不良造成的?？朔姆椒梢栽诩訕忧跋入x心，加一些尿素等增溶輔助試劑。
         2. 蛋白條帶太寬。當(dāng)連接到相鄰泳道的蛋白條帶時(shí)，由于上樣量過大，可以減少上樣量。
         3. 電泳時(shí)間比平時(shí)長(zhǎng)?？赡苁怯捎谀z緩沖體系和電極緩沖體系的pH選擇錯(cuò)誤，即緩沖體系的pH與被分離物質(zhì)的等電點(diǎn)相差過小，或者被分離物質(zhì)的離子強(qiáng)度。緩沖系統(tǒng)過高。
         4. 指示器變成微笑符號(hào)（指示器正面顯示向上的曲線），說明凝膠冷卻不均勻，中間部分冷卻不好，導(dǎo)致分子的流動(dòng)性不同。
         5. 由于電泳槽的原因，指示器變成哭臉符號(hào)（指示器正面呈向下的曲線）該裝置不適用，特別是凝膠和玻璃板組成的“夾心"底部有氣泡或隔膜附近的凝膠未*聚合時(shí)。
         6.凝膠時(shí)間錯(cuò)誤。通常凝膠會(huì)在 60 分鐘，1 小時(shí)內(nèi)凝固。如果設(shè)定時(shí)間太慢，可能是TEMEN、APS劑量不夠或失效。 APS現(xiàn)在應(yīng)該準(zhǔn)備好使用了，TEMED不穩(wěn)定，容易被氧化成黃色。如果凝固過快，可能是 APS 和 TEMED 的量過多。這時(shí)候凝膠太硬容易開裂，電泳時(shí)容易燒壞凝膠。